Nieinwazyjna diagnoza odrzucenia nerkowego aloprzeszczepu przez pomiar RNA dla perforiny i Granzyme B w moczu ad 7

Odpowiednia liczba próbek moczu uzyskanych od pacjentów z epizodem ostrego odrzucenia i tych bez takiego epizodu była następująca: 6 i 43 w dniu 1, 2 lub 3 po transplantacji; 5 i 26 w dniu 4, 5 lub 6; oraz 6 i 14 w dniu 7, 8 lub 9. Środki, błędy standardowe i wartości P zostały oszacowane przy użyciu dwukierunkowej analizy wariancji na mieszanym poziomie. We wszystkich przypadkach są wyświetlane wartości przekształcone w dzienniku. Sekwencyjne próbki moczu uzyskano od 37 pacjentów w ciągu pierwszych dziewięciu dni po transplantacji. Zastosowano mieszaną dwukierunkową analizę wariancji w celu oszacowania i porównania średnich poziomów mRNA perfo-rin, mRNA granzymu B i mRNA cyklofiliny B w dniach od do 3, od 4 do 6 i od 7 do 9 u 8 pacjentów u których wystąpiło ostre odrzucenie w ciągu 10 dni po transplantacji oraz u 29 pacjentów, u których nie doszło do ostrego odrzucenia w ciągu pierwszych 10 dni. Poziomy mRNA dla perforyny i mysiego granzymu B, ale nie dla mRNA cyklofiliny B, były wyższe w próbkach moczu otrzymanych w dniach od 4 do 6 i od 7 do 9 od pacjentów, u których wystąpiło ostre odrzucenie niż w próbkach od pacjentów bez ostrego odrzucenia (ryc. 4).
Dyskusja
Stwierdziliśmy, że epizod ostrego odrzucenia allograftu nerkowego, ważnego i możliwego do leczenia czynnika ryzyka alloprzeszczepu, można dokładnie i nieinwazyjnie zdiagnozować poprzez pomiar mRNA perfryny i granzymu B w komórkach moczowych. Perforynę, która jest magazynowana i wydzielana przez granulki cytotoksycznych komórek efektorowych, tworzy pory w błonach komórek docelowych i powoduje śmierć komórki.16 Granzym B, który ulega ekspresji głównie przez aktywowane komórki cytotoksyczne, jest integralnym członkiem litycznej maszynerii komórki cytotoksyczne.17 W modelu cytotoksyczności granuli-egzocytozy, perforina tworzy dziury w błonie docelowej komórki i ułatwia wejście granzymu B do komórki.18-23 Granzym B następnie indukuje fragmentację DNA i śmierć komórki poprzez aktywację kaspaza 3.30
Badania na zwierzętach i pacjentach sugerują stosowanie perforyny i granzymu B w odrzucaniu alloprzeszczepu. Myszy z niedoborem perforyny mają upośledzone cytotoksyczne komórki efektorowe i słabo odrzucają alloprzeszczepy serca. [31] Myszy z niedoborem granzymu B mają zmniejszoną aktywność cytolityczną. 20 Badania kliniczne sugerują, że ostre odrzucenie charakteryzuje się zwiększoną ekspresją genów cytotoksycznych w allografcie.32-38. cechy funkcjonalne perforyny i granzymu B stanowiły uzasadnienie oceny poziomów mRNA dla perforyny i mysiego granzymu B w komórkach moczowych jako markerów ostrego odrzucenia.
Wzrost poziomu kreatyniny w surowicy jest często pierwszym klinicznym wskaźnikiem ostrego odrzucenia i jest obecnie najlepszym wskaźnikiem zastępczym tego leku. Brakuje jednak czułości i swoistości. Ograniczenia związane z monitorowaniem odrzucenia alloprzeszczepu przez pomiar kreatyniny w surowicy zostały zdecydowanie ujawnione w obserwacji, że 30 procent biopsji allograftu wykonanych u pacjentów ze stabilną czynnością nerek lub u pacjentów, którzy zostali uznani za pomyślnie leczonych z powodu odrzucenia, ujawnia cechy histologiczne ostrego odrzucenia.29,39 Te okultystyczne odrzucenia wydają się istotne biologicznie, ponieważ leczenie lepiej zachowuje strukturę i funkcję przeszczepów nerkowych.40
Dokładna diagnoza ostrego odrzucenia zależy od inwazyjnej procedury biopsji igłowej alloprzeszczepów
[przypisy: zgorzel wilgotna, próba ksantoproteinowa, wątroba muszkatołowa ]
[patrz też: zapalenie okołostawowe barku, nawykowe zwichnięcie rzepki, pryskające bańki ]